Détection moléculaire de la résistance de Mycobacterium tuberculosis à l'isoniazide et la rifampicine

Last updated on 30-6-2023 by Lee Mbambu Maswaku

Description du test

​Utilisation de différentes techniques de biologie moléculaire en vue de détecter la présence éventuelle de mutations géniques conférant la résistance à un antituberculeux.
Nous utilisons :

  • des PCR spécifiques détectant les mutations : S315T du gène katG et C-15T du promoteur du gène inhA (mutations les plus fréquemment impliquées dans la résistance à l’isoniazide)
  • une PCR suivie de séquençage permettant l’analyse de la région du gène rpoB dont les mutations confèrent la résistance à la rifampicine
  • le kit GenoType MTBDRplus (Hain) : capable de détecter les principales mutations des gènes katG, inhA et rpoB conférant, la résistance respectivement à l’isoniazide et la rifampicine
  •  le kit GenoType MTBDRsl (Hain) : capable de détecter les principales mutations des gènes  gyrA, gyrBrrs et eis conférant la résistance à respectivement les fluoroquinolones et la kanamycine–amikacine-capréomycine.

Résultat :
Présence ou absence de mutations spécifiques associées à la résistance à certains antituberculeux.

But du test

Détection de mutations géniques spécifiques conférant aux souches du complexe M.tuberculosis la résistance à certains antibiotiques antituberculeux (principalement isoniazide et rifampicine).

Critères pour effectuer ce test dans le cadre des activités de référence

  • Confirmation d’une résistance phénotypique.
  • Diagnostic urgent de résistance aux antibiotiques en cas de forte suspicion de multirésitance. Le résultat moléculaire doit toujours être confirmé par la suite par la technique bactériologique.
  • Surveillance de la résistance. 

Instructions sur les échantillons

Type :  Culture de mycobactéries sur milieu spécifique liquide ou solide ou ADN extrait de prélèvements cliniques positifs à l’examen direct (bacilles acido-alcoolo-résistants)

Quantité minimale:

  • Culture : 3-5 ml ou 1 tube (milieu solide)
  • Extrait d’ADN : 80-100 µl

Instructions sur le transport

Acheminement dans un triple emballage et à température ambiante. (En effet, l’expérience a montré que l’envoi à température ambiante n’altère pas la qualité de la culture ou ADN extrait)

Le récipient doit être fermé hermétiquement.

Demandes non acceptées

Echantillon abîmé, de volume insuffisant ou ayant coulé dans l’emballage.

Culture ou ADN de mycobactérie atypique.

Délai pour recevoir le résultat des tests (et fréquence d’analyse)

Délais : 21 jours ouvrables

Jours d’analyse : LU-MA-ME-JE-VE.

Communication des résultats des tests 

  • Un rapport d’analyse est envoyé pour chaque demande d’analyse reçue​  
  • Si l’analyse est réalisée dans le cadre de l’activité de surveillance de la résistance aux antibiotiques, un commentaire est ajouté sur le rapport d’antibiogramme envoyé au laboratoire d’origine (sans demande explicite de sa part pour cette analyse supplémentaire).
  • Si, lors de la réception de l’échantillon, celui-ci est endommagé à un point tel que son analyse s’avère impossible, le demandeur sera contacté et un formulaire standard lui sera envoyé (au lieu d’un rapport d’analyse).

Pathogen info

Pathogen(s): 
Mycobacterium

Accréditation

Is the analysis accredited?

Materials and methods

Material(s): 
Method reference: 
SOP 12/MY/52

Turnaround time and time slots

Turnaround time: 
21 days

Service in charge of the analysis

Contact person(s)

  • Head of the National Reference Laboratory " Mycobacterium"

Contact email

Analysis categories

Medical

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