Description du test
Les Legionella sont détectés par la culture des échantillons respiratoires ou autres, y compris les biopsies pulmonaires et les liquides pleuraux. Toutes les espèces et tous les sérotypes sont détectés. Les échantillons sont inoculés sur gélose BCYE (Buffered Charcoal Yeast-Extract).
But du test
Diagnostic et/ou confirmation du diagnostic. Il est important d’obtenir des isolats humains et des isolats environnementaux pour pouvoir les comparer dans le cadre d’enquêtes épidémiologiques. Une PCR sera faite sur tous les échantillons pour lesquels une culture est demandée.
Critères pour effectuer ce test dans le cadre de l’activité de référence
- Les échantillons peuvent être envoyés en cas de pneumonie et doivent être soumis lors de la phase aiguë de l’infection, de préférence avant le début de l’antibiothérapie.
- Tandis que les cultures bactériennes de sécrétions respiratoires sont généralement sélectionnées pour la pertinence de la coloration de Gram, ces critères ne sont pas applicables pour les échantillons destinés à la culture de Legionella. Les patients atteints de légionellose produisent des expectorations diluées et aqueuses, qui peuvent contenir quelques globules blancs mais les Legionella ne sont pas colorées.
- Les cultures pour des raisons de « test de guérison » seront rejetées, car elles ne sont pas utilisées pour suivre la réponse du patient au traitement.
Instructions sur l’échantillon
- Echantillonnage : récipient stérile avec un bouchon à vis
- Expectoration : minimum 3 ml
- Aspiration bronchique : minimum 3 ml
- Aspiration endotrachéale : minimum 3 ml
- Liquide de lavage bronchoalvéolaire (LBA) : 5 ml
- Liquide pleural : minimum 5 ml
- Biopsie pulmonaire : placer un morceau de tissu sur une compresse de gaze et l’humidifier par une solution saline stérile. Placer la compresse de gaze dans un récipient stérile avec un bouchon à vis.
- Sang : il n’y a aucune méthode fiable pour cultiver les Legionella du sang.
- Autres spécimens : une culture systématique d’autres spécimens n’est pas indiquée sauf s’il existe une suspicion clinique élevée de maladie affectant ces sites. Contacter le CNR pour obtenir des instructions.
- Conditions de stockage : 2-5°C. Les Legionella survivent généralement plus d’une semaine dans les échantillons cliniques.
Instructions sur le transport
- Conditions de transport : < 1 jour.
- Spécifications du milieu de transport : non applicable
- Les récipients ne sont pas fournis par le CNR.
Demandes non acceptées
Échantillon inapproprié ou insuffisant
Liquide pleural : les spécimens de moins de 5 ml ne sont pas fiables pour la culture des Legionella.
Stockage ou transport incorrect: éviter le transport à température ambiante. Legionella peut survivre pendant un long transport, mais leur isolement peut être compromis par la croissance de bactéries commensales dans les échantillons.
Les échantillons ne seront pas traités si le formulaire de demande n’est pas complètement rempli.
Délai pour recevoir le résultat d’analyse (et fréquence d’analyse)
Les échantillons sont traités à l’arrivée au CNR (entre 8h et 20h). Le TAT médian est de 7 jours (identification et sérotypage); maximum 14 jours.
Communication des résultats des tests
- Par courriel sécurisé et par courrier : en cas de résultat positif
- Par courrier : en cas de résultat négatif