Description
Certains isolats de Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus) produisent deux hémolysines : l’hémolysine thermostable directe (TDH) et l’hémolysine apparentée à l’hémolysine thermostable directe qui est une hémolysine thermolabile directe (TRH). L’expression de ces hémolysines est un facteur de virulence pour l’espèce V. parahaemolyticus. En effet, elles ont des activités lytiques, cytotoxiques et entérotoxiques. Dans le milieu naturel, les souches porteuses des gènes codant pour les hémolysines sont rares alors que ces gènes sont généralement présents au sein des souches isolées de selles de patients souffrant de gastro-entérites. Aussi, la recherche de la pathogénicité par la détection des gènes codant ces hémolysines s’avère nécessaire. Une PCR duplex a été développée par Kaysner et al. 1999 et est appliquée au centre de référence afin d’évaluer la pathogénicité des souches de V. parahaemolyticus.
But du test
Détection des hémolysines TDH et TRH, facteurs de virulence des V. parahaemolyticus.
Critères pour effectuer ce test
Toute souche de Vibrio reçue et confirmée V. parahaemolyticus par le CNR et isolée de prélèvements humains.
Instructions sur l’échantillon
A partir d’une culture de la souche de V. parahaemolyticus à envoyer, préparation d’une sous-culture fraîche et pure sur un milieu nutritif et envoi soit sur la gélose en boîte, soit après inoculation massive en profondeur dans une gélose nutritive en tube, soit sur écouvillon dans son milieu de transport après avoir récolté la sous-culture.
Instruction sur le transport
- La souche doit être conditionnée dans un milieu de transport adapté (boîte ou tube gélosé, écouvillon avec milieu de transport) et correctement identifiée.
- Acheminement dans un triple emballage :
- Boîtes et tubes bien fermés hermétiquement ;
- Emballage avec un matériel adsorbant dans un emballage secondaire (étui de type «transportblister «, containers plastiques ou sac en plastique à fermeture à glissière) ;
- Le tout ensuite placé dans une enveloppe matelassée ou une boîte.
- Aussi rapidement que possible à T° ambiante, dans les 72 heures après la préparation.
- Etiquetage et conditions de transport conformes à la règlementation en vigueur concernant les matières infectieuses.
- Pour chaque souche, le formulaire de demande (téléchargeable sur le site des CNR de Sciensano) doit obligatoirement être rempli avec le plus de précisions possibles et joint à chaque souche envoyée.
Demande inacceptable
Les critères suivants serviront à rejeter un échantillon :
- Échantillon non identifié,
- Formulaire de demande incomplet,
- Conditions évidentes de conservation ou de transport inappropriées,
- Identification de V. parahaemolyticus non confirmée.
Délai pour recevoir le résultat d’analyse
- Fréquence d’analyse : à la demande.
- Délai la détection : 5 jours ouvrables.
- Jours d’analyse : tous les jours ouvrables du lundi au vendredi.
Communication des résultats des tests
- Comment : communication téléphonique (1) et compte-rendu papier par la poste (2) ou compte-rendu électronique (3).
- Quand : lorsque des résultats pertinents d’analyses (même partiels) sont connus (téléphone, email :1 ou 3), lorsque tous les résultats d’analyses sont connus (rapport écrit : 2 ou 3)
- Résumé de tous les résultats disponibles dans le rapport annuel.